细胞学堂 | 收到的细胞脱落了？碎片多？黑点多？

科学研究中需要用到各种细胞系作为实验模型，这些细胞系通常可以从各大细胞库获取。

而在收到细胞库寄送来的常温细胞时，常常会遇到一些问题，比如细胞脱落、皱缩、有黑点。

这篇文章将帮助大家解决这些常见问题。

一、收货时，细胞脱落

有些细胞本身贴壁不牢，很容易造成细胞脱落（如293系列，TM3，TM4，Raw264.7，原代内皮细胞，原代平滑肌细胞）。

另外，运输过程中受到碰撞或气温过低，也可能导致细胞脱落。

处理办法

① 将脱落细胞进行离心收集，并在离心管中消化。

② 仍然贴壁的细胞，按照常规方法加入胰酶或其他解离剂消化。

③ 再将消化好的脱落细胞和贴壁细胞混合，按比例接种到新的培养器皿中。

常温运输的C2C12细胞收货时发现脱落细胞

C2C12细胞处理后第二天，有少量漂浮细胞

C2C12细胞处理后第四天，细胞正常生长

（图片由客户提供，仅供学习参考）

二、收货时，细胞皱缩

运输过程中，路途颠簸加上温度不稳定，常温细胞会发生回缩。

处理办法

放入培养箱静置2-4小时，若4小时后仍然没有伸展，延长静置时间。注意，过夜静置时，需倒出部分培养基，留5-10mL在瓶中，瓶盖拧松透气，保持气体交换（L15培养体系除外）。

若有脱落细胞，需离心收集。

SH-SY5Y细胞发货前状态(普诺赛提供)

SH-SY5Y细胞收货后状态(客户提供)

SH-SY5Y细胞收货时皱缩、脱落

SH-SY5Y细胞处理后第三天

（图片由客户提供，仅供学习参考）

三、收货时，细胞黑点较多

当受到运输环境影响时，细胞会发生应激反应，分泌活动增加，导致分泌蛋白增多，呈黑色圆球状，分布无规律。

同时，路途中凋亡的细胞碎裂后将产生细胞碎片，为黑色或透明色，呈不规则状，分布无规律。

另外，有些细胞本身分泌活动较强，培养时常伴随黑点。

处理办法

★贴壁细胞放培养箱静置2-4小时后，正常换液或传代；

★悬浮细胞800~1000rpm（约160~200g） 低速离心3min去除细胞碎片。通常培养数天后，细胞状态会逐渐稳定下来。

KYSE-30细胞收货时观察到细胞碎片

KYSE-30细胞继续培养后细胞碎片减少

（图片由客户提供，仅供学习参考）

小贴士：遇到小黑点问题时，首先要排除微生物污染，再按以上办法解决哦~

细胞碎片/分泌物和微生物污染的区别

细胞碎片（由客户提供，仅供学习参考）

微生物污染（由客户提供，仅供学习参考）