外泌体分离试剂盒（沉淀法）
货号： P-CA-505
Price： ￥1580 ￥780
Size：
50Tests
20Tests
产品信息
| 分离方法 | 聚合物沉淀法 | ||||||||||||
| 产品优势 | 1. 适用样本广 血浆、血清等复杂样本和细胞上清、尿液等简单样都都适用； 2. 回收率高 相较于其他方法，获取的外泌体浓度高； 3. 操作简便 不需特殊设备，操作简便； 4. 快速 外泌体分离仅需1.5 h； 5. 重复性好 基本无操作熟练度要求； 6. 高通量 能同时处理多个样本。 |
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| 运输条件 | 冰袋运输 | ||||||||||||
| 保存条件 | 2-8℃，避光储存 | ||||||||||||
| 保质期 | 18个月 | ||||||||||||
| 产品组份 |
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| 使用方法 | 1.准备工作 1)去试剂盒中2-8℃保存组分（Exosome Precipitation Solution、Solution A）从冰箱拿出，恢复至室温。 2)建议选择新鲜样本；如果样本保存在-80℃，请在37℃水浴锅中解冻，备用。 2.样品预处理 1)去除细胞。4℃，300 g，离心5 min，转移上清到新的离心管； 注意：对无细胞的样品，可以跳过此步骤。 2)去除细胞及细胞碎片。4℃，2000 g，离心10 min，转移上清到新的离心管； 3)去除大体积颗粒。步骤 2）得到的上清，4℃，14000 g，离心30 min，转移上清到新的离心管。 注意：去除大体积颗粒（大囊泡）的替代方法：将步骤 2）得到的上清，经0.2 μm微孔滤膜过滤，收集滤出液。 3.沉淀外泌体 1)根据外泌体样本类型，选择合适的操作方案： ?血清、血浆外泌体样本操作方案 取预处理后样品500 μL到1.5 mL离心管，加入500 μL Solution A混匀，然后再加入250 μL Exosome Precipitation Solution，上下颠倒充分混匀； 注意：如果需要调整血清/血浆外泌体样品体积，可以按样本：Solution A：Exosome Precipitation Solution = 2：2：1的体积比，等比例放大或缩小。 ?细胞培养上清、尿液外泌体样本操作方案 取预处理后样品1 mL到1.5 mL离心管，加入250 μL Exosome Precipitation Solution，上下颠倒充分混匀； a.若样品体积过大，可以浓缩到1-2 mL后，再进行该步骤。 b.如果需要调整细胞培养上清 / 尿液外泌体样品体积，可以按样本：Exosome Precipitation Solution = 4：1的体积比，等比例放大或缩小。 2)室温孵育30min (快速流程)； 注意：如果时间充裕，推荐4℃ 孵育过夜 (高回收流程)。 3)置于离心机4℃，12000 g离心30 min，弃上清。 注意：吸弃或小心倾倒上清后，用200 μL移液器尽可能吸净上清。 4.回收外泌体 1)外泌体重悬。向上述沉淀中加入200 μL Solution A，用移液器轻柔上下吹打混匀； 2)收集外泌体颗粒。将重悬液转移至新的1.5 mL离心管，4℃ 12000 g 离心5 min，保留上清液，该上清液中富含外泌体颗粒。 注意：若沉淀较多，取离心后上清液，12000 g，5 min，离心多次，直至无明显沉淀，获取上清液即为外泌体。 3)分离的外泌体可立即开展后续实验。24 h内进行后续实验，可4℃保存；否则分装后保存在-80℃。 |
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| 自备仪器耗材 | 高速冷冻离心机、离心管 | ||||||||||||
| 产品名称 | 外泌体分离试剂盒（沉淀法） | ||||||||||||
| 产品规格 | 50Tests / 20Tests |
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Q1:提取的外泌体进行Western blot前是否需要加入RIPA试剂裂解？
需要添加，一般按照1:1的比例加入RIPA试剂，但具体的比例得根据RIPA试剂的说明书来调整
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Q2:如何鉴定提取的外泌体？
通常使用透射电镜检测（形态）、粒径检测（大小）、Western blot检测等方法鉴定提取的外泌体。在进行Western blot检测时，通常检测外泌体标志蛋白（CD63、CD9、CD81、TSG101等）。
识别码示意图
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