NK-92MI（人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞）

文献(14) 说明书

货号： CL-0533

Size：

1×10^6Cells/T25 1×10^6Cells/Vial×2Vials

生长培养基： MEMα[PM150422]+0.2 mM Inositol+0.1 mM β-mercaptoethanol+0.02 mM Folic Acid+12.5% HS[164215]+12.5% FBS[164210]+1% P/S[PB180120]

产品信息

产品名称	NK-92MI（人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞）
别称	NK-92 MI; NK-92 mi; NK92-MI; NK92MI; NK-92 transfected with MFG-Hil2
生长特性	悬浮细胞
细胞形态	淋巴母细胞样
冻存条件	冻存液：90% FBS+10% DMSO 温度：液氮
培养方案A（默认）	生长培养基:MEMα[PM150422]+0.2 mM Inositol+0.1 mM β-mercaptoethanol+0.02 mM Folic Acid+12.5% HS[164215]+12.5% FBS[164210]+1% P/S[PB180120] 培养条件: 气相：空气，95%；CO₂，5%, 温度：37℃
培养方案B（可选）	生长培养基: 培养条件: 气相：, 温度：37℃
推荐传代比例	5×10<sup>5</sup>-1×10<sup>6</sup> cells/mL
推荐换液频率	2-3次/周
注意事项	该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液；请勿直接倒掉细胞培养液。

背景描述	NK-92细胞是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株IL-2依赖型NK细胞株。NK-92MI细胞是转染得到的源自NK-92细胞的IL-2非依赖的NK细胞株。亲本细胞NK-92通过微粒体基因转化法用逆转录病毒MFG-hIL-2载体携带的人IL-2cDNA进行转化。可能由于载体整合到基因组DNA中，转化是稳定的。这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性；铬释放试验显示它能杀死K562细胞和Daudi细胞。NK-92细胞有以下特征：CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54表面标记阳性；CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表面标记阴性。其亲本IL-2依赖的细胞株NK-92细胞及另一株同样来源于NK-92细胞株的IL-2非依赖的细胞株NK-92CI都可从ATCC得到。NK-92MI细胞和NK-92CI细胞这两个变种都包含、表达并合成hIL-2cDNA。NK-92MI细胞合成的IL-2水平比NK-92CI高，而亲本细胞不合成表达。1998年9月提交到ATCC的培养物污染了支原体，其后代通过BM细胞周期蛋白处理21天消除支原体。处理后6周，用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测，结果都呈阴性。
年龄（性别）	50Y Male
组织来源	外周血
细胞类型	肿瘤细胞
肿瘤类型	淋巴瘤细胞
生物安全等级	BSL-2

Q1:NK-92MI细胞达到什么密度可以传代？

细胞是成团生长的，培养过程细胞会聚集在培养瓶当中某个区域生长，可以轻轻晃匀之后，静置5-10分钟观察，大部分区域100倍镜下有6-8个细胞团可以补液分瓶，推荐1:2-1:3传代。
Q2:NK-92MI细胞状态不好的时候需要补加IL-2吗？

此细胞是不依赖IL-2，培养过程无需添加IL-2，如果有部分死细胞，可以尝试提高血清比例5%。如果是状态特别差需要急救的情况，可以适当添加IL-2，有助于细胞恢复状态。
Q3:NK-92MI细胞培养过程有单个细胞及碎片，是状态不好了吗？

细胞团之间也是有一些单个的细胞即碎片，这个是正常现象，平时不要刻意吹散细胞团，如果细胞团过大，可以轻轻晃动或轻拍培养瓶，使细胞团块分散开。如果碎片过多，可以换液时800转离心5分钟，去除碎片，一周左右离心一次即可。
Q4:为什么我看的文献里的细胞培养条件和你们官网的培养条件不一样呢？

部分细胞是会出现多种培养条件的，我们公司优先选择引种来源的培养条件以及建系者所用培养条件，出现差异的原因是不同实验室在保藏过程中更改了细胞的培养条件，为了避免细胞突然更换培养条件后不适应，建议您优先使用厂家推荐的培养条件培养。

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